產(chǎn)碳青霉烯酶的操作法則
產(chǎn)碳青霉烯酶作為細菌（尤其是革蘭陰性桿菌）主要耐藥機制，自1982年英國從粘質(zhì)沙雷菌中分離出碳青霉烯酶以來，已陸續(xù)報道70余種碳青霉烯酶。由于產(chǎn)酶編碼基因位于染色體或質(zhì)粒上，可以快速整合至細菌中，特別是臨床分離的銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌對碳青霉烯類抗生素耐藥率不斷增高，給臨床治療和醫(yī)院感染防控帶來巨大的挑戰(zhàn)。
產(chǎn)碳青霉烯酶具有很廣泛的水解底物譜，臨床一旦遇到產(chǎn)該酶的菌株，很難治療，目前尚無有效藥物。進行聯(lián)合藥敏試驗，或進行聯(lián)合抗菌藥治療。目前已報道的可檢測產(chǎn)碳青霉烯酶的方法主要有EDTA協(xié)同試驗、改良Hode試驗、三維試驗（以亞胺培南替代頭孢西丁，其余操作相同）以及Etest法。
操作：
1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基：取瓶內(nèi)干粉42.5g溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中，移取2.0ml增補劑S1加入到培養(yǎng)基內(nèi)，充分攪拌混勻。也可根據(jù)需要按照42.5g/L和2.0ml/L的比例擴大或縮小制備培養(yǎng)基的量。
2、加熱至100℃，不停攪拌，使其*溶解。若使用微波爐加熱，應(yīng)將培養(yǎng)基加熱沸騰，立即移出，輕輕搖勻，再放入微波爐加熱，觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀荩敝?溶解即可。切勿使培養(yǎng)基溢出。
3、增補劑S2：取增補劑S20.25g溶于2.0ml無菌去離子水中，攪拌均勻，過濾（0.45um濾膜）備用。也可根據(jù)需要按照0.25g/L的比例擴大或縮小制備增補劑的量。
4、將溶解*的增補劑S2加入到冷卻至45℃~50℃的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和增補劑S1中，輕輕地搖動均勻，配制成產(chǎn)碳青霉烯酶的顯色培養(yǎng)基，傾注平皿，使其凝固，晾干備用。
保存該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nèi)貯存1個月（2℃~8℃，避光）。
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