梅里埃VITEK 芽胞菌鑒定卡(BCL)為完整的全自動細菌鑒定和藥敏分析系統(tǒng),細菌鑒定采用生化反應(yīng)數(shù)碼鑒定原理。可以以較少的實驗人員及較短的準備和處理時間,提供準確的測定結(jié)果。數(shù)據(jù)庫應(yīng)涵蓋革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、芽胞菌、酵母菌、奈瑟氏菌及嗜血桿菌、厭氧菌;必須有生物菌的鑒定能力(鼠疫桿菌、霍亂弧菌、吐拉菌等)。
梅里埃VITEK 芽胞菌鑒定卡(BCL)方法:
1. 菌株分離與鑒定: 將可疑標本接種于SBA 和Choc-V 瓊脂平板上, 置5 %CO2 孵箱, 35 ℃培養(yǎng)24 ~72 h 觀察結(jié)果。細菌的分離培養(yǎng)和鑒定按文獻進行, 分離到的菌株經(jīng)涂片革蘭染色鏡檢、觸酶、氧化酶試驗后, 用VITEK-(NHI 和GNI)鑒定試卡鑒定到種。
2. 氧化酶試驗。
3. DNA 酶試驗。
4. 乙酰酯酶試驗:用無菌生理鹽水將3-乙酰吲哚紙片沾濕, 取待檢菌落涂在紙片上, 3 min 內(nèi)出現(xiàn)藍綠色為陽性反應(yīng)。以MC 的ATCC 25238 , 全國臨床檢驗中心質(zhì)控菌株9602 , 9707 , 0101 作為陽性對照。
5. 生長指數(shù)(GI)測定: 取經(jīng)Rchoc 平板24 h 培養(yǎng)的卡他莫拉菌ATCC 25238 菌落于2 ml 無菌鹽水中, 制成0.5 麥氏單位菌懸液, 再用無菌鹽水進行1 :10 連續(xù)稀釋, 取10-5 、10-6 、10-7稀釋度菌液100 μl分別接種在9 種培養(yǎng)基上(Rchoc 、Schoc 、Choc-V 、SBA 、MHA 、MHB 、BCA 、NUA 、ZLA), 分別置普通孵箱和5 %CO2 孵箱各1 套, 于35 ℃孵育24 、48 、72 、96 h ,計數(shù)少于10 個菌落平板上的菌落數(shù), 并用游標卡尺量出菌落直徑, 求其均值(mm), 再乘以此稀釋度的對數(shù)即得GI。